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단백질을 정량하는 방법이다. 이 방법은 단백질 종류에 따른 발색 차이가 적고, 계면활성제의 영향을 잘 받지 않으며 반응 생성물이 안정하다는 장점이 있다. 하지만 감도가 낮고, 단백질 아미노산 조성에 따른 반응이 상이하며 환원당이 존
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단백질을 정량하는 방법이다. 이 방법은 단백질 종류에 따른 발색 차이가 적고, 계면활성제의 영향을 잘 받지 않으며 반응 생성물이 안정하다는 장점이 있다. 하지만 감도가 낮고, 단백질 아미노산 조성에 따른 반응이 상이하며 환원당이 존
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이 방법은 시료 내 항원의 양이 적거나 다른 간섭물질의 양이 분석하려는 항원의 양보다 훨씬 많을 때 유용하게 활용된다.
: 효소면역측정법 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA)는 시료내의 특정단백질의 정량법으로 널리 활용되고 있습니다. 분
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☞ 단백질, 단백질의 기능, 단백질의 변성
http://bio.123study.org/study/BIOLOGY/4/4-1/%BF%B5%BE%E7%BC%D2%B0%CB%C3%E2.htm ☞ 닌히드린반응, 뷰렛반응
http://blog.naver.com/givetime.do?Redirect=Log&logNo=60000877085 ☞ 단백질정량법(Lowry-method, Bradford-method)
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보여준다. 단점으로는 여러가지 준비시약이 많이 필요하고 절차가 복잡하다는 점 그리고 다른 화합물에 의해 간섭을 많이 받는 단점을 꼽을 수 있다. *Bradford 방법*
*Bradford 방법의 장점과 단점*:
*그 외 다른 단백질 정량 분석법*
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um을 이용하는 법
- 특정 단백질이 280nm부근의
파장자외선을 흡수하는 성질을 이용
Lowry 법
- biuret법과 phenol법을 합성한 방법
Table 3. 조 단백질의 다양한 정량방법
Table 2. 두류의 식품분석표
수분
%
열량
cal
단백질
g
지방
g
탄수화물
회분
g
칼슘
m
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이용하여 단백질 농도 그래프를 작성하고 오줌의 단백질 농도를 측정한다.
- Bradford법: 색소가 단백질의 염기성과 방향족 아미노산 측쇄와 결합하여 이를 흡광도 측정→단백질 정량 하는 방법
*시약 및 기재:
①Bradford 염료 시약 - Coomassie Brill
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도 ninhydrin 반응, biuret법, phenol법, 자외선 흡수 spectrum을 이용하는 법, Lowry 법 등의 방법들이 있다. (표 3참조)
정 량 법
특 징
kjeldahl법
단백질내의 일정한 질소함량을 기준으로
질소함량을 정량 하여 구하는 방법
ninhydrin 반응
아미노산과 ninhydrin
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olution이 시료속에 들어있는 단백질들과 반응을 하면서 단백질이 많이 들어있을수록 점점 짙은 푸른색을 띄게 되는데 이로 인해 BSA양이 증가할수록 흡광도도 점점 증가하여 이번 실험에서는 전체적으로 이론값과 비슷하게 나온 것을 볼 수 있
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dford stock solution:
① Coomassie brilliant blue G-250 100mg을 50mL 96% EtOH에 녹인다.(overnight).
② ①에 85% phosphoric acid 100mL을 가한후 증류수 850mL로 1L를 맞춘다.
*. Whatman filterpaper로 걸러준 후 갈색병에 넣어서 4℃에서 보관
3. 방법
① 시험관에 단백질 양
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