|
전기영동장치에 1 x TBE를 넣은 후 gel을 넣는다.
4. well의 가장왼편에 size maker를 넣고 차례로 loading dye와 DNA를 섞은(1:5정도) solution을 주입한다.
5. 전기를 걸어준 뒤 20~30분 기다린다
6. DNA가 내려오면 자외선 하에서 확인한다.
* 낮은 전압에서 선
|
|
|
mic DNA는 긴 염기가 그대로 있기 때문에 하나의 긴 띠 모양으로 나타나는 반면, PCR은 몇 개의 선택적 부위만을 증폭했기 때문에 끊어진 몇 개의 띠가 나타난다.
-고찰:
1번과 6번 칸이 각각 슈퍼 포플러의 Genomic DNA와 PCR의 전기영동 결과이다.
|
|
|
PCR
Introduction : PCR
(a) Denaturation
(b) Annealing
(c) Extension
Method
Result
Subject Preparation of chromosomal DNA
Introduction : 전기영동
1.전기영동...
2. 전하에 미치는 pH의 영향
3. 전기영동의 기법
Method
Subject Small-scale Preparations of Plasmi
|
|
|
mplate DNA를 다룰 때 실 수가 있었기 때문에 실험 결과가 제대로 나오지 않은 것으로 생각된다.
어떻게 보면 전기영동과 PCR은 정말 기본적인 실험이고 많이 하는 실험 중 하나 였을 수도 있는데, 실패했다는 것이 너무 아쉽다. 그리고 의학유전
|
|
|
오일은 닦아내고 반응액을 새 소형 튜브에 넣는다.
9) 5～15㎕의 시료를 아가로스 겔 전기영동으로 분석한다. 이때는 반드시 DNA 마커를 동시에 영동하는 것을 잊어서는 안 된다. a.실험 제목
b.실험 목적
c.이론
d.실험 기구 및 시약
|
|
|
와 LB Broth 제조 및 멸균
2.2. LB-Ampicilin 첨가
2.3. E. coli JM109 (pGEM-T-Easy-DXS, pBlueScript-KS(+)) 접종
2.4. Plasmid 분리
2.5. 제한 효소 절단
2.6. Agarose Gel 제작
2.7. 전기영동 및 DNA 확인
3. 결과
3.1. E. coli JM109 배양 확인
3.2. 제한효소 절단
3.3. Agarose Gel
|
|
|
DNA를 무한정 복제 할 수 없다는 것에 대해 의문점이 생겼는데 그 이유는 PCR cycle이 돌수록 DNA pol의 활성이 줄어들기 때문이라는 사실도 알 수 있었다.
마지막으로 실험 결과 사진에서 band 색이 연하게 나온 사람도 있고 진하게 나온 사람도 있
|
|
|
PCR
일반적으로 PCR로는 많아야 3kb, 좀 더 이상적일려면 1kb 미만의 크기의 DNA를 증폭할 수 있으나 이 방법을 사용하면 5-40kb의 DNA도 증폭할 수 있다. 이 long accurate PCR에서는 polymerase를 두 개 사용하는데, 그중 하나가 minor-proofreading을 할 수 있어
|
|
|
잘리는 양상이 다르다.... 1. 실험일자
2. 실험목적
3. 서론
(1) PCR
(2) DNA 클로닝
(3) Plasmid preparation
(4) 전기영동
4. 실험과정
(1) PCR
(2) Ligation
(3) Transformation & seeding
(4) Plasmid preparation
(5) 전기영동
5. 실험결과
6. 고찰
7. 참고문헌
|
|
|
band로 가시화하여 확인
쉽게 설명하면 튜브에 재료를 집어넣고 기계로 뜨겁게, 차갑게 일정시간 변화를 주면 Taq polymerase가 알아서 유전자를 합성해주는 원리 PCR이란 ?
PCR이 사용되는 실험
PCR 진행 과정
전기영동
UV 촬영
|
|
메뉴펼치기
